多重PCR扩增试剂盒-RNAi技术-试剂-生物在线
多重PCR扩增试剂盒

多重PCR扩增试剂盒

商家询价

产品名称: 多重PCR扩增试剂盒

英文名称: 5×Multiplex PCR Kit

产品编号: HZ0037

产品价格: 0

产品产地: 中国/上海

品牌商标: 沪震生物

更新时间: 2023-08-17T10:24:20

使用范围: null

上海沪震实业有限公司
  • 联系人 : 鲍丽雯
  • 地址 : 上海市闵行区闵北路88弄1-30号第22幢AQ136室
  • 邮编 : 200612
  • 所在区域 : 上海
  • 电话 : 139****0749
  • 传真 : 021-60345367
  • 邮箱 : www.shzbio.net

 多重PCR扩增试剂盒

中文名称:多重PCR扩增试剂盒
英文名称:5×Multiplex PCR Kit
产品规格:50μl×100T|50μl×500T
本试剂盒针对多重PCR的高产需求及DNA聚合酶的强聚合能力而优化,可在同一个PCR反应体系中,对多个基因使用多对引物同时进行特异性扩增(最多可加入10对引物)。当引物对较多时,可适当添加HotStart Taq DNA聚合酶和dNTPs以达到良好的扩增效果。

产品用途:常规PCR鉴定、高产量PCR、高通量PCR、多重PCR。

试剂盒组成

组份 体积
5×Multiplex PCR Buffer(5U/μl) 1ml
HotStart Taq DNA聚合酶(5U/μl) 100μl
dNTPs(10mM) 250μl



使用建议

  • 使用本制品时务必将Buffer反复混匀后再加,避免因组分不一导致结果差异;
  • 配置和分装反应液时请一定使用新的(无污染的)枪头以避免污染;
  • 如扩增条带多,可适当添加酶和dNTPs;
  • 当多重PCR扩增产物的长度均在1 kb以内时,使用3%~4%浓度的Agarose gel进行电泳分离效果最佳。



多重PCR引物设计注意事项

  • 尽量减小各引物间的Tm值差;
  • 目的片段长度尽量在1kb以下;
  • 引物的长度保持在22~30bp,GC含量在50~60%为宜,并避免局部区域GC或AT的含量过高;
  • 引物应用于多重PCR前要预先对各目的基因进行扩增,以确认引物的特异性及反应性能。



应用实例

图例一)50μl扩增体系中,以50ngλDNA为模板,对长度范围在100-800bp之间的片段的扩增结果。
泳道M:DL2000 DNA Marker;泳道1,泳道2:使用7对不同引物同时扩增的结果

常用反应体系(50μl):

成分 体积
5×Multiplex PCR Buffer 10μl
上游引物*n 0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物*n 0.2-1.0μM(终浓度)
模板 50ng
dNTPs 1.5μl
HotStart Taq DNA聚合酶 1μl
ddH2O 至50μl



常用PCR循环

当扩增片段<3K:
94℃ 5min
30次循环 94℃,20s
57℃,20秒
72℃,根据产物长度调整,1kb/min
72℃ 5min
4℃ 保温



常见问题及解答

  • 没有扩增产物或量少:保证每一管的引物,buffer,酶等已全部加入;使用高质量的引物,并检测引物是否降解;确认模板的质量及浓度;适度提高缺失(或低产)条带对应的引物用量;确保预混体系已混匀彻底;
  • 存在非特异性扩增:检查单对引物的扩增性能与特异性;检查酶用量是否过多,酌情减少酶的用量;降低模板使用量;
  • 电泳时条带模糊:检查引物是否出现质量问题,比如降解;减少起始模板量;降低电泳电压,更换新的电泳缓冲液。



储存条件:-20℃ 

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!